三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase，ATPase)是一種水解酶，是催化ATP合成的一種酶，三磷酸腺苷酶根據所用激活劑、抑制劑以及酶定位的不同分為膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、線粒體三磷酸腺苷酶等，ATPase能水解三磷酸腺苷為磷酸腺苷和磷酸，此酶只作用于磷酸與磷酸之間的高能鍵，因而釋放大量能量，其催化反應如下：
A-P-P-P + H2O→A-P-P + H3PO4 +能量
Leagene ATPase染色液(鈣鈷法)原理在于三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷為二磷酸腺苷和磷酸，磷酸根與鈣離子結合為磷酸鈣沉淀，再依次被置換為磷酸鈷和硫化鈷，最終產物為黑色硫化鈷沉淀。該試劑僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。
